样本免稀释、免纯化丨IgG检测的高效解决新方案

在人体中，IgG是含量最丰富的抗体类别（7-15 g/L），约占血清免疫球蛋白总量的80%。根据重链基因差异，IgG又可分为四个亚型，即IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。^[1]各亚型具有不同的结构特点，其补体结合能力和Fc受体结合能力各不相同,在清除病毒/细菌以及招募激活免疫细胞等方面各具优势。在小鼠中，IgG也可进一步分为四个亚型：IgG1、IgG2a/IgG2c（取决于小鼠品系）、IgG2b和IgG3。对于治疗性抗体的开发，亚型是决定其体内生物学活性的关键因素之一。

图1. 人IgG及IgG亚型结构示意图[1]

 

HiLA IgG检测试剂盒

在抗体开发的不同阶段，经常需要对人或小鼠IgG（或其亚型）进行准确定量。然而，传统检测方法常面临通量低、耗时长、样本前处理复杂（如稀释、纯化）等挑战。针对这些痛点，为度生物基于均相发光技术开发了HiLA系列IgG检测试剂盒，为细胞培养上清、血清或缓冲液等多种样本基质中的IgG检测提供高效解决方案，满足多样化的应用场景需求。

 

产品优势

超宽的检测范围：细胞上清无需稀释即可直接检测

样本免纯化：省去冗长抗体纯化步骤，流程更简化

操作便捷：最快30分钟完成检测，满足高通量需求

微量检测：仅需2-10μL样本量，适合珍稀样本分析

 

检测原理（竞争法）

试剂盒的核心组分包括受体微球交联的抗IgG抗体(R1)、生物素标记的IgG(R2)和与供体微球交联的链霉亲和素(R3)。

检测体系中，受体微球交联的抗IgG抗体和生物素标记的IgG混合孵育，形成免疫复合物，再与供体微球反应形成发光复合物。经680nm激发光照射后，供体微球产生单线态氧并扩散至受体微球，受体微球接受能量产生615nm发射光。当待测样本中含有IgG时，会竞争结合anti-IgG，阻碍发光复合物的形成。待测样本中IgG浓度与光信号成反比。通过感光元件收集光信号，采用数学拟合计算待测物中IgG浓度。

 

检测流程

以96孔板检测为例：（若采用384浅孔板，各组分用量同比缩至1/5）

 

验证数据

——动态范围

6款试剂盒均具有0-1000μg/mL的宽动态范围，样本无需稀释、纯化，适用于高浓度细胞上清等样本的直接检测。

 

——样本相关性

-同西门子化学发光结果比对(n=30)，相关系数r=0.9589,具有良好的样本相关性。

-样本类型：人血清 

 

-同HPLC测定结果比对(n=22)，相关系数r=0.9778，具有良好的样本相关性。

-样本类型：细胞上清 

 

-同HPLC测定结果比对n=22)，相关系数r=0.9923，具有良好的样本相关性。

-样本类型：细胞上清 

 

——性能参数汇总

*表中仅展示检测流程1下的性能参数，更多信息见产品说明书

 

验证数据

 

参考文献

[1] Napodano, Cecilia et al. “Immunological Role of IgG Subclasses.”Immunological investigations vol. 50,4 (2021): 427-444.