新品速递丨His标签蛋白高效纯化新工具——VDX NTA Ni ultra

His标签是专门设计用于重组蛋白的纯化，一般为6-10个组氨酸残基组成，由于其分子量比较小，对目标蛋白性质影响较弱，是目前最常用的标签。

在His标签蛋白纯化过程中，标签蛋白与金属离子之间的结合强度是核心因素，

这一过程受到多种因素的影响，包括Ni的配位情况、标签长度、标签的位置（C端或N端）、标签的暴露程度，以及缓冲液的pH值等。

在实际的纯化过程，常常会遇到部分标签蛋白挂柱较弱，大量流穿，最终会导致目标蛋白的纯度不高、收率低，甚至出现目标蛋白完全不结合的情况。

材料与方法：使用传统Ni-NTA和VDX NTA Ni ultra在相同条件下纯化同一标签蛋白。

实验结果：在相同上样条件下，传统Ni-NTA在结合和洗杂过程中均有大量目标蛋白损失，显著降低了目标蛋白的回收率

VDX NTA Ni ultra的对目标蛋白的结合力更强，结合和洗杂过程蛋白损失显著降低，回收率显著高于传统Ni-NTA。

层析条件

层析柱：VDX NTA Ni ultra、传统Ni-NTA；5mL柱，柱高10cm；

样品：大肠杆菌裂解液

平衡液：50mM PB，300mM NaCl，pH8.0

洗脱液：50mM PB，300mM NaCl，500mM 咪唑，pH8.0

流速：1mL/min