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提高免疫层析灵敏度的关键!

人阅读 发布时间:2020-04-20 17:37


如何提高免疫层析灵敏度

免疫层析技术是 20 试剂 80 年代发展起来的结合了色谱层析技术和免疫技术发展起来的一种检测方法。从最开始的胶体金免疫层析,到后来的荧光免疫层析,一直到后面的量子点免疫层析法,上转发光免疫层析法,以及时间分辨免疫层析法。

免疫层级技术一直发展至今,凭借着简单快捷、易操作等优势广泛应用于众多领域,但是该技术在快速检测过程中仍然存在着一些问题,并且有很大的提升空间。其中灵敏度的问题虽然随着新型标记物的发展得到一定程度的提高,但是相对化学发光法,酶联免疫法还是有一定的差距。

结合能力的影响:抗原抗体的筛选极大的影响着标记的灵敏度。抗体本身的亲和能力,抗体的空间结构,抗体的纯度,甚至抗体放久了之后存在降解等都是影响灵敏度的重要原因。同时层析是在固相上面反应,抗体的空间结构也会发生一定的变化,而这些都是影响试剂灵敏度的重要原因。同时在一定范围内加大抗原抗体的使用量也是可以在一定程度上面对于灵敏度的提高有作用。

标记物的影响:对于荧光层析,胶体金层析微球或者金颗粒的大小可以极大影响产品的灵敏度。在符合条件的情况下,为了追求高灵敏度可以尽可能选择较大的颗粒。比如,荧光微球可以选择 300nm 或者定制更大,胶体金也可以烧制更大的金颗粒等。
从第一代的胶体金标记,到后期的荧光素标记,再到现在的微球标记,量子点标记等。新型标记材料的发展,在一定程度上面已经提高了灵敏度。最新的时间分辨微球的灵敏度相对于最初的胶体金标记灵敏度已经提高了 2-3 个数量级。新型材料的使用已经逐渐在灵敏度上进行了一定的提高。
苏州为度生物专注于纳米微球的研发,包括红色荧光微球,蓝色荧光微球,绿色荧光微球和时间分辨荧光微球可以满足常规产品的要求。

辅材的影响:不同的材料对灵敏度影响还是蛮大的。比如硝酸纤维素孔径的大小,孔径越小可以提高的灵敏度越多,但是目前市场上最小孔径基本上就是 180 的膜了。其他的耗材,比如吸水纸,吸水纸吸水能力越强可以吸收越多血清(血浆等)对于提高灵敏度也有一定作用。

反应体系的选择:抗体或者抗原的选择也影响产品的灵敏度。有些抗体可能在酶联免疫方面或者化学发光方面有着非常好的效用,但是放在免疫层析方面效用就一般,所以筛选出高灵敏度的抗体是提高免疫层析灵敏度最优良的方法。
在不同的反应体系中抗原和抗体有着不同的表现形式,比如有些 ph,或者一定的离子强度情况下抗体空间位点更容易打开,更容易结合对于灵敏度的提高也是有一定的积极作用。同时,在反应体系中增加一定的亲水性,或者疏水性的物质,对于灵敏度也是有一定作用,量就需要研发人员针对不同的项目去调整了。

综上,抗体本身结合能力,标记物,各种辅材,反应体系等都可以在一定程度或多或少的提高灵敏度。

 
苏州为度生物技术有限公司是一家专注于生物技术领域内微球产品规模化生产与应用的高新技术企业,我司已经通过 ISO9001-2015 质量体系认证。产品主要有乳胶微球、彩色微球、磁性微球、荧光微球、流式微球、标准微球等全系列微球产品,产品粒径均一可控,多种功能指标可进行定制性调节。我们为客户提供:高质量的纳米级、微米级微球产品;微球产品的个性化定制服务;微球产品的全球 OEM 服务;微球产品的规模化蛋白修饰服务;微球应用中间体的 OEM 服务;微球应用的整体技术解决方案。

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