核酸纯化磁珠/磁性微球的选择
3500 人阅读发布时间:2019-09-05 09:41
磁性微球是一种新型磁性材料,兼具固相磁性材料与液体流动性的特点,在外磁场的作用下可以定向移动与集中,当外磁场撤去后,稍加振荡或抽吸即可均匀分散于液体中。
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核酸结合到磁性微球上主要依靠静电作用、疏水作用和氢键作用,经过表面修饰的超顺磁性纳米微球与核酸进行特异性结合,形成「核酸-磁性微球复合物」。在外加磁场的作用下,复合物即可分离出来,经过洗脱去除非特异性吸附的杂质,即可获得目的核酸。
根据表面修饰的不同,核酸纯化用磁性微球主要有以下几种:
· 硅羟基磁性微球 · oligo(dT) 修饰磁性微球
· 羧基磁性微球 · 链霉亲和素修饰磁性微球
核酸纯化用磁性微球产品质量参差不齐,要如何选择合适的磁性微球?以下是核酸纯化磁性微球选择金标准,仅供参考:
1. 粒径均一;
2. 尺寸合适:根据样本选择尺寸合适的微球;
3. 适当的密度:良好的悬浮性,更适应高通量自动提取,并增加实验的稳定性和均一性;
4. 基础材料的组成(亲水或疏水);
5. 表面化学特征(反应基团和数量):有丰富的表面活性基团,可和生化物质偶联,并在外磁场的作用下实现与被待测样品的分离;
6. 表面物理特征(比表面积和孔径):一般来说粒径越小,比表面积越大,但比表面积并不全由粒径大小决定,也并不是比表面积越大吸附效果就越好;
7. 厂家的批量生产能力:单批次产能高,确保产品性质稳定;
8. 磁珠的非特异性吸附低;
9. 磁响应时间:磁响应时间影响固液分离效率;
10. 超顺磁性(优异的再分散能力):外磁场作用下超顺磁性材料磁化率远高于一般顺磁性材料的磁化率。
结语:选择优异的磁性材料,可提高您的实验效率,保证实验结果的准确性。但是除了磁性微球本身的性质之外,试剂体系也要和磁性微球相匹配,不同的磁性微球适用的体系不尽相同,需要根据具体情况进行调试测试。
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