VDX MMA ultra寿命验证案例：200次循环纯化性能稳定

长期稳定性，是评价层析填料性能的重要指标。在生物大分子分离与纯化过程中，层析填料的使用寿命直接影响生产成本、工艺稳定性以及产品质量一致性。

 

填料寿命受到多种因素影响，包括：

（1）层析柱装填质量
规模化生产中，填料多次循环使用后的性能稳定性至关重要，层析柱装填质量是决定填料使用寿命的关键因素之一。

（2）样品性质及纯化工艺阶段
通常情况下，捕获和粗纯阶段由于样品杂质含量较高，填料性能衰减速度相对较快；而精纯阶段样品纯度较高，填料可维持更长的使用周期。

（3）填料再生、清洁及保存策略
合理的CIP（Cleaning-In-Place）流程能够有效去除残留杂质，减少填料性能下降。

 

VDX MMA ultra：兼具高载量与长期稳定性的复合阴离子交换填料

VDX MMA ultra是为度生物VDX系列中的一款复合阴离子交换填料（Mixed-mode Anion Exchange Resin）。凭借优异的耐受性和纯化性能，VDX MMA ultra适用于蛋白、抗体及复杂生物分子的高效纯化。

 

VDX MMA ultra寿命验证案例

本案例对VDX MMA ultra填料进行了200个循环的测试，每次循环后进行标准CIP（1 M  NaCl，3 CV-1 M NaOH,3 CV, 保留30min – 1 M NaCl，3 CV），同时检测含有人IgG培养上清载量和收率、标准蛋白分离三个指标。

测试数据表明VDX MMA ultra具有较高的载量（初始10%DBC为35.6 mg/mL），运行100个循环后填料载量维持在初始10%DBC的88%左右，运行200个循环后载量水平保持在初始10%DBC的80%左右（Figure 1）；所有循环的收率稳定（Figure 2），对于三种标准蛋白的分辨率也保持稳定（Figure 3）。

 

200次使用循环-动态载量(hIgG)

柱子规格：0.8×10 cm

样品蛋白浓度：IgG（2.5-3 mg/mL）

平衡液：50 mM Na₂HPO₄, pH 8.0

洗脱液： 100 mM 柠檬酸钠, pH 3.0

柱子CIP过程中使用1 M NaOH浸泡30 min，10% DBC在线性流速250 cm/hr的条件下每10次循环检测一次。

BT: breakthrough，穿透;

DBC, dynamic binding capacity，动态载量

Figure 1. VDX MMA ultra binding capacity for polyclonal human IgG (hIgG)

 

200次使用循环-蛋白回收率(hIgG)

柱子规格：0.8×10 cm

样品蛋白浓度：IgG（2.5-3 mg/mL）

平衡液：50 mM Na₂HPO₄, pH 8.0

洗脱液： 100 mM 柠檬酸钠, pH 3.0

柱子CIP过程中使用1 M NaOH浸泡30 min，hIgG收率在线性流速250 cm/hr的条件下每10次循环检测一次。

Figure 2. Recovery of hIgG by VDX MMA ultra

 

 

200次使用循环-标准蛋白分离度

柱子规格：0.8×10 cm

标准蛋白：

Lysozyme 溶菌酶（）

Ovalbumin, OVA 卵清白蛋白（）

Soybean Trypsin Inhibitor, STI大豆胰蛋白酶抑制剂（）

平衡液：20 mM Bis-Tris, pH 6.5

洗脱液：20 mM Bis-Tris,1 M NaCl, pH 6.5

0-100% B液线性洗脱, 纵坐标为蛋白峰对应电导（mS/cm），柱子CIP过程中使用1 M NaOH浸泡30 min，10% DBC在线性流速250 cm/hr的条件下每10次循环检测一次。

Figure 3. Separation of standard protein by VDX MMA ultra

 

科学CIP策略延长填料使用寿命

为保持填料循环使用载量水平，定期进行CIP可防止杂质（如脂质、内毒素、核酸以及再生后残留在柱床中的沉淀或变性蛋白）在填料中积累，并有助于维持VDX MMA ultra的载量、流速特性和整体性能。

· 通常建议在每个纯化循环后进行CIP。

· 进行CIP之前，应先用酸性缓冲液（例如50 mM磷酸钠，pH 3，或100 mM乙酸）对VDX MMA ultra进行清洁，以有效去除结合蛋白。

· 根据存在的杂质类型，为每个工艺设计具体的CIP方案。

· CIP的频率取决于进料料液的性质和状态。

· 通常VDX MMA ultra推荐按标准的CIP程序使用（详见产品说明书），例如使用1 M NaOH、2 M NaCl或70%乙醇。

 

VDX MMA ultra高载量高稳定性层析填料

VDX MMA ultra为蛋白纯化及复杂生物制品生产提供了一种可靠、高效、可持续的层析纯化解决方案。通过200次循环寿命验证，VDX MMA ultra展现出：

✅高动态结合载量
✅稳定蛋白回收率≥90%
✅持续分离分辨率
✅优异CIP耐受能力