DLS偏大、TEM太慢？纳米流式让VLP真实粒径一目了然

在生物医药领域，病毒样颗粒（VLP）疫苗的粒径检测是一项贯穿研发、生产和质控全流程的核心分析项目。它不仅在于了解颗粒的大小，更在于能够关联产品质量、安全性和有效性的关键控制点。世界卫生组织（WHO）在《重组人乳头瘤病毒样颗粒疫苗质量可控、安全和有效的指导原则》中，建议监测病毒样颗粒（VLP）的粒径的大小和结构。

长期以来，科研人员在VLP粒径表征上常面临两难选择：
-DLS（动态光散射）： 虽然快，但测得是水合粒径，且容易受环境干扰，导致结果往往比真实值偏大。
-TEM（电镜）： 虽是直观的“金标准”，但制样复杂、耗时长，仪器昂贵且运营成本高，难以满足高通量的工业质控需求。

Exoplorer^TM纳米流式仪
快速、准确、简便实现VLP粒径表征

中国食品药品检定研究院（NIFDC）在《中国药事》发表重要研究成果，对比了多种粒径检测手段。为度生物提供的Explorer^TM纳米流式仪及尺度标准微球在研究中大放异彩，为疫苗质量控制提供了更精准的解决方案。

Exoplorer^TM纳米流式仪（Exoplorer^TM Nano-flow Cytometer）集瑞利散射与荧光检测技术于一身，可以快速、准确、简便地测定 VLP 颗粒疫苗产品粒径以及对产品稳定性进行监测。

PART.01  高精准度与稳定性
针对不同尺寸的标准微球测定，准确度RSD均在0.5%以下，精密度RSD均在0.6%以下。
6批HPV疫苗样品重复性检测结果显示，平均粒径分布在61.85-74.87 nm之间，RSD最高仅1.04%。

表1. 不同尺寸标准微球粒径的准确性和精密度检测

 

PART.02   卓越的分辨率
实验显示，为度生物Explorer^TM纳米流式仪能完美区分 67 nm、105 nm、199 nm和238 nm 四种混合微球，四个独立峰清晰可见，区分度优异且稳定性高。

图 1 67nm、105nm、199nm和 238nm标准微球混合后检测粒径代表图（n=3）

PART.03   更接近“真实”的粒径

实战对比1： 在HPV51型样品（样本2、3、4）的检测中，DLS结果高达120 nm，与纳米流式法测得结果差异高达40nm，说明纳米流式法更能反映真实粒径情况。
实战对比2：在HPV35型（样本1）和 HPV51型（样本2）的检测中，纳米流式法与负染电镜结果相近，说明对于不同样本其检测结果稳定且与“金标准”一致，适用场景更广。

表 2 不同批次样本粒径检测

文献通过热加速试验展示了纳米流式的另一项绝活。在56℃持续加热下，研究人员清晰观测到：

-1小时内：粒径变小，可能是蛋白变性导致结构破坏和整体颗粒的皱缩。
-6小时：粒径变大最高增至 90 nm，可能与颗粒的变形和聚集有关。

通过为度生物纳米流式技术，研究人员可快速、简便地监测VLP颗粒产品的热稳定性性状变化。

图 2 HPV 疫苗原液样品热加速试验（56℃）中平均粒径的变化曲线

作为生命科学领域的赋能者，为度生物致力于为广大生物医药企业提供高性能的纳米流式检测设备及配套标准品，助力疫苗研发！

 

Exoplorer^TM纳米流式仪
Exoplorer^TM纳米流式仪专为生物纳米颗粒的表征而设计，包括外囊泡、病毒、脂质纳米颗粒（LNPs）、细菌、亚细胞结构及其他纳米颗粒。凭借卓越的灵敏度、分辨率和通量，Exoplorer^TM纳米流式仪可在5-3000nm范围内实现全面的纳米颗粒分析，包括粒径分布、颗粒计数及生化特性评估，是生命科学和生物医学研究的革命性工具。

优势

• 双激光配置，8 个荧光通道
• 浓度检测准确率 95%
• 粒径检测准确率 90%
• 细胞外囊泡单颗粒表征

 

尺度标准微球

尺度标准微球是一系列含有二氧化硅的纳米级颗粒溶液，专为纳米流式仪设计，适配外囊泡、病毒、脂质纳米颗粒（LNPs）等生物纳米颗粒粒径分析。

优势

• 校准的平均粒径通过NIST溯源至标准尺和标准微球
• 覆盖40-1000nm宽范围检测
• 经多技术平台验证，且具备完整质量体系

参考文献：
[1] 路琼,纳涛,赵春辉,等.纳米流式法对病毒样颗粒的粒径测定[J].中国药事,2025,39(06):645-652.DOI:10.16153/j.1002-7777.2024-11-0052.
[2] World Health Organization. (2016). Recommendations to assure the quality, safety and efficacy of recombinant human papillomavirus virus-like particle vaccines, Annex 4, TRS No. 999. World Health Organization.