Q1：在免疫层析实验中，可以选择哪些微球？微球粒径如何选择？
A1：一般情况下，可以选择时间分辨荧光微球、绿色荧光微球、红色荧光微球、彩色微球（红色、蓝色）、磁性微球。通常使用的微球粒径在 100nm-400nm 之间，其中最常用的是 200nm 和 300nm 粒径的微球。

Q2：在微球沉淀之后，使用超声的方式进行重悬过程中有什么好的建议？
A2：微球的分散可以使用水浴超声的方式进行，这种方式可以有效的使微球分散但又不会使溶液发热，同时选择水浴超声的另一优势是不会像探头插入式超声那样因为使用次数的增多而导致探头污染的可能。
我们没有发现偶联有蛋白的微球超声时会有什么问题，但是需要注意的是如果偶联有蛋白的微球超声时间过长的话也会使偶联的蛋白脱落。

Q3：稀释浓度较高的微球，一般使用的稀释液是什么？
A3：一般使用去离子水稀释微球，当然也可以使用某些缓冲液，如偶联抗体前则可以选择偶联缓冲液对微球进行洗涤和稀释。

Q5：微球在免疫层析试纸条上流动性不好的原因是什么？有什么好的建议？
A5：微球流动性不好的原因有：
1. 可能因微球的粒径太大而不能有效的穿过层析试纸条的孔径；
2. 微球在缓冲液中发生聚集而不能透过滤膜；
3. 微球通过疏水键结合到膜的表面，由于使用了有机溶剂可能会看到有颜色的染料在试纸条上流动。
建议：使用更小粒径的微球或更大孔径的层析试纸；添加表面活性剂使微球的分散性更好；使用蛋白或表面活性剂将膜表面进行封闭从而减少其对免疫微球的粘性。

Q6：将包被有抗体的微球喷在膜上干燥之后，如何保证其被样本润湿后可以在膜上保持很好的流动性？
A6：流动性差的原因可能是微球的粒径太大，或者是微球凝集在一起无法流动，亦或是由于样品中的液体太少导致不能使所有的微球被完全释放。
我们可以通过下面的方法来测试微球在膜上面的流动性：
1. 在膜上面点一些微球；
2. 在微球完全干燥之前加入一些水或缓冲液使微球在膜上流动；
3. 如果不能够流动，那么微球在这个膜上面存在物理上的运动障碍。
建议：对膜进行预处理可以有效的避免膜对抗体的吸附；另外，也可以在膜上添加一些非常亲水的物质如蔗糖，可以快速的再水化使微球释放完全，海藻糖等低聚糖也可以起到很好的效果。

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